實驗原理:
1.成骨誘導的過程是使鈣離子能夠以鈣鹽的方式沉淀下來,即“鈣結節",鑒定鈣結節的染色方法常用茜素紅染色法。
2.茜素紅:茜素磺酸鈉,茜素s,茜素紅s,茜素胭脂紅,1,2-二羥基蔥醒-3-磺酸鈉,1,2-二羥基蔥醒-3-磺酸鈉鹽。橙黃色或黃棕色粉末。易溶于水,微溶于乙醇,不溶于苯。1%水溶液pH為2.15,其水溶液呈前黃褐色,加鹽酸后變為黃色,加氫氧化鈉后則變成藍紫色。有刺激性。能與許多金屬離子生成有色化合物,能與錯、釷、鋁、鈦及鈣發生顯色反應。
3.染色原理:茜素紅與鈣發生顯色反應,產生一種深紅色的帶色化合物,這樣成骨誘導的細胞外面沉積的鈣結節也就被染成了深紅色。
實驗試劑及儀器:
1.試劑:PBS10醛緩沖液0.1%茜素紅-Tris-HCL染液蒸餾水
2.儀器:倒置顯微鏡
實驗步驟:
1.棄培養液,PBS沖洗2次
2.10%甲醛緩沖液固定10min
3.蒸餾水沖洗3次
4.加入0.1%茜素紅-Tris-HCL染液(pH8.3),37℃下染色30min
5.蒸餾水沖洗
6.在倒置顯微鏡下觀察有無茜素紅染色陽性細胞
毓秀生物科技(上海)有限公司是一家專注于生物科技前沿技術研發和科研技術服務的公司,公司建有專業的分子生物學、細胞生物學、組織病理學實驗室,為眾多生物醫藥企業、科研機構、醫院及高校提供分子生物學、細胞生物學、病理形態學等方面科研服務。公司核心團隊曾在國內外許多優秀學府從事過多年研發工作,秉承“為客戶創造價值,為員工實現夢想,為社會創造財富"的經營理念,堅持以技術創新為先導,以服務質量為根本,為中國生物醫藥和科學研究提供優質的產品和技術服務。