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伊紅染液

更新時間:2024-08-27

簡要描述:

伊紅染液是一種酸性生物染料 ,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。為1%的水溶液。

伊紅染液是一種酸性生物染料 ,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。為1%的水溶液。

伊紅染液使用說明:

1. 樣品處理

a) 對于石蠟切片:

二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘。

無水乙醇5分鐘。

90%乙醇2分鐘。

70%乙醇2分鐘。

蒸餾水2分鐘。

b) 對于冰凍切片:

蒸餾水2分鐘。

c) 對于培養(yǎng)細胞:

用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。

蒸餾水洗滌2分鐘。

換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘。

2. 伊紅染色

對于上述處理好的樣品:

伊紅染色液染色染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。

此時,如果需要直接觀察,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水、透明和封片處理。

注:如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染,可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進行伊紅染色。

3. 脫水、透明、封片或進行其它染色

a) 脫水、透明、封片:

95%乙醇脫水2分鐘。

換用新鮮的95%乙醇再脫水2分鐘。

二甲苯透明5分鐘。

換用新鮮的二甲苯,再透明5分鐘。

用中性樹膠或其它封片劑封片。

顯微鏡下觀察,細胞漿呈粉紅色或紅色。

b) 進行其它染色:

如果進行免疫熒光染色,或進行Hoechst等熒光染料的染色,在伊紅染色液染色后:

70%乙醇洗滌2次,每次2分鐘。

PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。

然后就可以進行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。


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