熒光原位雜交技術fish檢測的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯的單克隆抗體與探針分子特異性結合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析。
熒光原位雜交技術fish檢測技術是利用熒光標記的特異性寡核苷酸片段作為探針,與染色體、細胞或組織中的核酸按照堿基互補配對原則進行雜交,通過熒光系統檢測,對待測DNA進行定性或相對定位分析。相對于傳統的核型分析技術,FISH技術具有快速及特異性高的優點。更由于其直觀性,成為眾多遺傳學診斷技術的有效驗證方法,具有廣闊的應用前景。
熒光原位雜交技術fish檢測技術有哪些主要優勢?
① 安全、快速、靈敏度高;
② 探針能較長時間保存;
③ 多色標記,簡單直觀;
④ 可用于中期染色體及間期細胞的分析;
⑤ 可應用于新鮮、冷凍或石蠟包埋標本以及穿刺物和脫落細胞等多種物質的檢測。
熒光原位雜交技術fish檢測的技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、可利用該報告分子與熒光素標記的特異親和素之間的免疫化學反應,經熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量或相對定位分析。
熒光原位雜交技術fish檢測技術系用熒光基團標記特異性探針,再將標記了熒光信號的探針與待測樣本進行原位雜交,在熒光顯微鏡下對熒光信號進行辨別和計數。通過熒光信號的顏色和數目的異常與否,達到對染色體疾病診斷、惡性腫瘤預測及預后判斷的目的。
熒光原位雜交技術fish檢測技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。